Методы диагностики ВИЧ инфекции

Диагностика ВИЧ: методы и исследования

Ранняя диагностика заболеваний – залог успешного лечения. Ставшее крылатым выражение, особенно актуально для ВИЧ-инфекции. Ведь заболевание неизлечимо полностью, и только своевременная диагностика позволяет взять течение болезни под контроль и выбрать тактику лечения, чтобы жить полноценной жизнью.

Ранний срок диагностики ВИЧ – со 2 недели от предположительного заражения.

Важность клинической диагностики ВИЧ

В понимании многих людей ВИЧ-инфицированный человек выглядит болезненно, изнеможенно. Он кашляет, чихает, чешется, стонет, у него все болит… На самом деле это не так! Проблема в том, что после инфицирования ВИЧ и в последующий инкубационный период симптомы полностью отсутствуют. Затем наступает острая фаза, на протяжении которой присутствуют симптомы, напоминающие ОРВИ или грипп. Но и они вскоре проходят, и наступает, так называемый, латентный период – продолжительный промежуток времени, когда ВИЧ-инфекция себя ничем не выдает. С момента инфицирования и до стадии пред-СПИДа может пройти порядка 10 лет, в течение которых, ни сам пациент, ни его окружение, даже и не подозревают о болезни. А когда она уже на полную мощность заявляет о себе, контролировать ее очень трудно. Сложно противостоять осложнениям ВИЧ, поддерживать практически разрушенную иммунную систему человека.

Очень важно понимать, что, хотя и есть группы риска – гомосексуалисты, наркозависимые и девушки легкого поведения – в основной массе, пациенты с ВИЧ-инфекцией – это обычные люди. Они учатся, ходят на работу, посещают общественные места, знакомятся в интернете – в общем, живут как все. К сожалению, но от ВИЧ никто не застрахован. Незащищенный половой контакт в порыве страсти, заветное тату без соблюдения стерильности, маникюр за полцены у начинающего мастера, уличная драка – все эти и множество других житейских ситуаций могут обернуться инфицированием ВИЧ.

Не ошибается лишь тот, кто не живет! Мы не можем знать все наперед, не можем исправить уже совершенных ошибок, но мы можем предпринять простые шаги для исправления их последствий – обратиться в ближайший кожно-венерологический диспансер, в местную клинику или специализированный СПИД-центр для сдачи анализов и ранней диагностики ВИЧ.

Благоприятные сроки для диагностики ВИЧ

Факт возможного инфицирования и плохое самочувствие без видимых причин – два веских основания для обращения к специалистам. Но отрицательный результат тестирования на антитела не всегда означает, что человек не инфицирован, так как существует период “серонегативного окна” (время между заражением и появлением антител), который составляет около трех месяцев. Поэтому лучше повторить их спустя 3 месяца с момента возможного инфицирования. Если же ответ опять будет отрицательным, но ваша тревога не проходит, и вы уверены в заражении ВИЧ, тогда лабораторную диагностику необходимо повторить спустя 6 месяцев после факта заражения.

Что касается плохого самочувствия, то поводом провериться на ВИЧ может быть сочетание следующих симптомов:

  • увеличение лимфатических узлов на шее, в паху, в области подмышек;
  • лихорадка;
  • мышечные или головные боли;
  • молочница и грибковые поражения, в том числе кандидоз полости рта;
  • воспаление слизистой носа, рта или глотки;
  • ночная потливость;
  • ломота в суставах;
  • длительная диарея;
  • тошнота, рвота;
  • резкое снижение массы тела;
  • высыпания на коже.

Важно понимать, что с момента, когда проявляются первые признаки ВИЧ-инфекции и до момента, когда заболевание переходит в латентную стадию, проходит очень мало времени – около 3-6 недель с факта инфицирования. Нельзя упускать из вида этот промежуток времени! Поскольку последующие 8-10 лет вы будет жить, нормально себя чувствовать и даже не подозревать о том, что больны ВИЧ-инфекцией. Драгоценное время будет упущено.

Современные методы диагностики ВИЧ

В настоящее время в диагностике ВИЧ используется двухуровневый подход – косвенные и прямые тесты. Косвенные тесты позволяют обнаружить в крови пациента специфические антитела к ВИЧ, а прямые тесты помогают выявить собственно сам ВИЧ и определить степень вирусной нагрузки на организм. В России стандартная диагностика ВИЧ включает следующие методы лабораторных исследований:

  • ИФА (иммуноферментный анализ).
  • Иммуноблот (иммунный блоттинг).

Также могут быть применены следующие методики:

  • Экспресс-тест ИХА (иммунохроматография).
  • ПЦР (полимеразная цепная реакция).

Диагностические принципы лабораторных исследований и степень их достоверности приведены в нижеследующей таблице.

Метод исследования

Диагностический принцип

Достоверность

Время после заражения

Экспресс-тест ИХА

Выявление антител к ВИЧ

93-99%

с 3 недели

Скрининговый тест ИФА

Выявление антител к ВИЧ и антигенов вируса

Иммуноблот

Антитела к нескольким белкам ВИЧ

99,9%

с 5 недели

ПЦР

Исследуется генетический материал вируса

80%

с 5 дня

98%

со 2 недели

При проведении исследований важно использовать сверхточное оборудование и верно интерпретировать результаты анализов. В противном случае точность диагностики снижается. При этом специалисты считают, что рациональнее всего проводить исследования в следующей последовательности.

  1. Сначала экспресс-диагностика, основанная на методе ИХА.
  2. В случае положительного результата – еще один анализ крови по методу ИФА.
  3. Положительный второй результат – проводится дообследование методом ИФА или иммуноблоттингом.
  4. В исключительных случаях для окончательной постановки диагноза можно применить более сложный и дорогостоящий метод ПЦР.

Экспресс-тесты методом ИХА или скрининг ИФА, предполагающий серологическое иммуноферментное исследование крови, выполняются в течение 15-30 минут. Высокая скорость диагностики актуальна в неотложных случаях, при планировании срочных операций. Но для постановки окончательного диагноза необходимо использовать основной метод диагностики – иммунный блоттинг. Если результаты ИФА и иммунного блоттинга противоречат друг другу, то возможно проведение референс диагностики – анализ сразу двумя методами. К проведению ПЦР прибегают в исключительных случаях, т.к. это наиболее дорогостоящий метод исследования. Далее разберем каждый из методов диагностики более подробно.

Экспресс-тест ИХА

Иммунохроматографические тесты неплохо зарекомендовали себя в экспресс-диагностике ВИЧ. Визуально они выглядят как полоски, на поверхность которых наносят исследуемый биологический материал (кровь, слюна). Для получения результата потребуется всего 10-15 минут, по истечении которых на тесте проявится, или цветная и контрольная полоска – положительный результат, подтверждающий наличие антител к ВИЧ, или только контрольная полоска – отрицательный результат.

С недавнего времени американская компания OraSure Technologies наладила массовое производство экспресс-тестов для домашнего применения. Они отпускаются без рецепта, и при желании их может использовать каждый желающий. Однако необходимо учесть, что по точности диагностики ИХА уступает методу ИФА, а для постановки окончательного диагноза необходимо проведение иммуноблота.

Скрининговый тест ИФА

Принцип метода основан на способности искусственно созданных белков ВИЧ, улавливать вырабатывающиеся в организме человека специфические антитела. В результате взаимодействия, тест-система ИФА изменяет окрас индикатора. Полученные изменения цвета обрабатываются с помощью аппаратуры, которая выдает результат анализа. При этом необходимо учесть, что скрининговый тест предназначен для выявления не ВИЧ как такового, а антител к нему. А поскольку для их появления в организме, необходимо время, то целесообразнее всего проводить скрининг спустя 3-6 недель после факта возможного инфицирования. Для этого достаточно всего 5 мл крови из вены пациента, забор которой проводят натощак, т.е. спустя 7-8 часов после последнего приема пищи.

Помимо положительного или отрицательного результата, тест ИФА может дать ложноположительный или ложноотрицательный результат.

  • Ложноположительный – речь может идти об сходных по своей структуре антителах, которые вырабатываются в организме при аутоиммунных заболеваниях, множественных миеломах, алкогольном гепатите и других патологиях.
  • Ложноотрицательный – скорее всего, тестирование было проведено преждевременно или иммунная система слишком слаба и не вырабатывает антитела к ВИЧ.

При сомнительном результате тест проводится повторно.

Иммуноблот – это основной метод диагностики ВИЧ, сочетающий иммуноферментный анализ (ИФА) с предварительным электрофоретическим переносом на нитроцеллюлозную полоску антигенов вируса. Для их выявления анализ проводят в три этапа:

  • подготовка нитроцеллюлозной полоски;
  • исследование пробы биологического материала пациента;
  • трактовка результата.

Таким образом, в ходе проводимого исследования, основные белки ВИЧ распределяются по поверхности в виде отдельных полос, которые проявляются при проведении иммуноферментной реакции и подтверждают наличие или отсутствие антител к антигенам ВИЧ. Полученные в ходе исследования иммунным блоттингом результаты считаются окончательными.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Главное отличие ПЦР от других методов диагностики – тест-система определяет ДНК вируса. С ее помощью можно выявить даже единичные вирусные частицы. Применение метода возможно уже на 5ый день после факта возможного инфицирования с точностью до 80%, что позволяет провести раннюю диагностику ВИЧ. Однако ПРЦ проводят только в исключительных случаях.

  • для постановки диагноза новорожденным, появившимся на свет от ВИЧ-инфицированных матерей;
  • при сомнительных результатах иммуноблота;
  • для оперативного исследования донорской крови;
  • для оценки уровня ВИЧ в крови инфицированного пациента.

Несмотря на высокую чувствительность метода ПЦР, он обладает меньшей диагностической чувствительностью к ВИЧ, что объясняется вариабельностью генома вируса. Поэтому для постановки окончательного диагноза данный метод не используется.

Новые и альтернативные методы диагностики ВИЧ

Недавно, сотрудниками Питтсбургского университета был разработан новый высокочувствительный тест для обнаружения скрытых вирусов – тест TZA. Для его проведения требуется меньше времени и крови пациента. Принцип действия TZA сводится к поиску гена, который активируется только при репликации вируса. Несмотря на то, что разработчики уверены в эффективности теста, большинство специалистов склоняется к тому, что TZA не сможет заменить существующие методы диагностики полностью, поскольку он характеризуется иным механизмом действия и не подходит абсолютно каждому ВИЧ-инфицированному пациенту.

Где и как можно пройти диагностику ВИЧ

Сегодня тест на ВИЧ-инфекцию не является проблемой. При желании пациента, кровь на анализ можно сдать анонимно и абсолютно бесплатно. Сделать это можно в медицинских организациях по месту жительства, в Свердловском областном центре профилактике и борьбы со СПИД (г. Екатеринбург, ул. Ясная, 46. Регистратура: (343) 383-30-18 Телефон доверия по проблеме ВИЧ/СПИД: (343) 310-00-31 (будни, с 9 до 20 часов).

Диагностика ВИЧ – дело сугубо добровольное. Однако есть четыре ситуации, для которых прохождение теста является обязательным:

  1. Донорство.
  2. Трудоустройство на работу, предполагающую непосредственный контакт с биоматериалом, который может содержать ВИЧ.
  3. Иностранные граждане.

Лица при призыве на военную службу, поступающие в военные учебные заведения.

Но и в этих случаях тестирование не может проводиться насильно, поскольку для любого медицинского вмешательства необходимо добровольное и осознанное согласие пациента. Именно осознанное, поскольку каждый из нас должен понимать важность своевременной диагностики ВИЧ.

Диагностика ВИЧ– одна из первостепенных задач, что стоят перед работниками кожно-венерологического диспансера, а также сотрудниками поликлиники.

Заболевание характеризуется врачами, как очень коварное. Характеризуется хроническим течением и не поддается полноценному лечению. Его важно своевременно выявлять, чтобы брать под контроль и предотвращать бесконтрольное распространение. В чем особенности вируса иммунодефицита человека, и как им можно заразиться, часто интересуются пациенты.

Какие есть способы диагностики болезни, и какие признаки позволяют заподозрить инфицирование?

Что это за вирус

Сегодня отовсюду можно услышать о том, насколько опасна ВИЧ-инфекция. Однако мало кто объясняет, в чем эта опасность заключается. В результате пациенты обладают неполным набором информации и, как следствие, не воспринимают угрозу всерьез. А ведь ВИЧ отличается крайней опасностью. Его относят к медленно прогрессирующим вирусным заболеваниям, склонным к хроническому течению. Поражается при этой патологии в первую очередь иммунная система.

Врачи обращают внимание пациентов на то, что смерть происходит не от самого вируса иммунодефицита, как такового.

Человек погибает от сопутствующих инфекций, обеспечить полноценную защиту от которых организм уже не способен. Также причиной гибели становятся раковые опухоли, с которыми оказывается не в состоянии бороться сниженный иммунитет.

На самом деле механизм воздействия ВИЧ-инфекции на иммунную систему довольно сложен. Как отмечают доктора, пациентам вовсе не обязательно понимать его досконально. Достаточно знать, что заболевание способно снижать уровень иммунитета до критических значений. В результате организм окажется неспособен защищаться от различных воздействий извне, что приведет к гибели рано или поздно.

Как происходит заражение

Важно понимать, что ВИЧ-инфекция сегодня окружена большим количеством самых разнообразных мифов.

Пациенты очень плохо информированы о том, в каких случаях можно заразиться, а когда здоровье находится вне опасности.

Первое, что необходимо запомнить, это то, что ВИЧ отличается очень сильной неустойчивостью в окружающей среде. Это значит, что патогенный микроорганизм способен полноценно и длительно жить только в человеческом теле. Он не переносит нагревания свыше 50 градусов (умирает мгновенно). Также не способен противостоять процессам высыхания. Далеко не все жидкости организма содержат достаточное количество вируса для того, чтобы произошло заражение.

Наибольшую опасность представляют:

  • кровь;
  • предэякулят;
  • сперма;
  • выделения из женского влагалища;
  • лимфа;
  • грудное молоко.

Если любая из этих жидкостей контактирует со слизистыми оболочками, в которых есть микротравмы, или с пораженной травмами кожей, происходит заражение.

Также оно возможно в том случае, если инородная жидкость попадает напрямую в кровоток. Слюна и слезы, вопреки распространенному мнению, угрозы не представляют. Из-за особенностей вируса и его низкой выживаемости передается он несколькими способами:

  • половой путь т.е. при незащищенных половых контактах, которые неминуемо влекут за собой соприкосновение биологических жидкостей и восприимчивых к патогену слизистых оболочек организма;
  • парентеральный путь т.е. перенос вируса с кровью при ее переливании или из-за использования нестерильного инструментария в медицинских целях;
  • вертикальный путь т.е. от матери к ребенку (сегодня если женщина принимает антиретровирусную терапию и отказывается от кормления грудью, вероятность заражения ребенка в родах сводится к минимуму).

Важно понимать, что если для заражения через кожу микротравмы или открытые раны обязательны, то для заражения через слизистую это не обязательно условие. Объясняется разница тем, что слизистые оболочки и кожные покровы человеческого организма имеют совершенно разное строение. Эту разницу необходимо учитывать.

По каким признакам заподозрить ВИЧ

Многие пациенты интересуются вопросом о том, по каким признакам обычно можно заподозрить заражение вирусом иммунодефицита человека.

Врачи рекомендуют обращаться для диагностики в СПИД-центры или поликлиники по месту жительства, если человек замечает у себя следующие симптомы:

  • необоснованное повышение температуры системного типа, которое нельзя объяснить какой-либо другой инфекцией, и которое сохраняется в течение длительного времени, несмотря на предпринимаемые для лечения меры;
  • сильное увеличение лимфатических узлов в размерах (в первую очередь страдают узлы в области паха, но возможно и их вовлечение во всем организме);

  • сильное снижение массы тела, которое нельзя объяснить диетами, стрессами, гормональными сбоями и другими причинами;
  • жалобы на расстройства стула, которые преследуют пациента в течение длительного времени, а найти причину, по которой они появились, не удается;
  • выраженная склонность к переходу любых инфекционных заболеваний в хронические формы, причем природа возбудителя особого значения не имеет, хронизируются как бактериальные, так и вирусные патологии;
  • развиваются заболевания, провоцируемые условно-патогенной микрофлорой, которая не представляет угрозы для человека, чей иммунитет работает в полной мере (например, микоплазмоз, уреаплазмоз, кандидоз и др.).

Клиника ВИЧ-инфекции очень неспецифична, как отмечают доктора. Из-за этого часто возникают трудности с постановкой диагноза. Многие пациенты вовсе игнорируют тревожные симптомы, предпочитая не обращаться за врачебной помощью. Даже в том случае, если заболевание сильно сказывается на их общем самочувствии.

Важно понимать, что ВИЧ-инфекция в течение длительного времени может вообще не давать о себе знать. А когда первые признаки появятся, человек может даже не связать их с возможностью своего заражения и делать попытки лечиться в домашних условиях.

Способы диагностики

Лабораторная диагностика ВИЧ разработана довольно давно и с успехом применяется для того, чтобы диагностировать это опасное заболевание.

Недуг нельзя опознать только по симптомам. Поэтому подтверждение диагноза на основании лабораторных методик часто играет решающую роль.

Существуют различные методы диагностики ВИЧ. В России в первую очередь предпочтение отдается иммунному блоттингу, а также ИФА-реакциям. Эти способы используются часто в качестве скрининговых, например, при проверке медицинского персонала.

ИФА-системы

Часто пациенты спрашивают у своих врачей, с какого способа стоит начать диагностический поиск при подозрении на заражение вирусом иммунодефицита человека.

Любой грамотный доктор скажет, что предпочтение стоит отдать иммуноферментному анализу. Именно эта методика на территории России является первым диагностическим этапом.

Принцип работы ИФА прост. В лаборатории врачами были созданы специальные белки. Они способны обнаруживать антитела, вырабатываемые организмом в ответ на контакт с ВИЧ, и взаимодействовать с ними. Затем к системе добавляют специальный фермент-индикатор, который изменяет свой цвет. На конечном этапе материал обрабатывается с помощью специального аппарата, и врач получает итоговый результат.

ИФА пользуется большой популярностью.

Прежде всего из-за того, что получить результаты можно даже в том случае, если с момента внедрения патогенна в организм прошло не более нескольких недель.

Важно понимать, что иммуноферментный анализ определяет не сам вирус в крови, а антитела к нему.

У многих людей они могут начать вырабатываться позже, чем через две недели, из-за чего результат может быть ошибочным. Существует несколько поколений ИФА-тестов.

Самыми современными и высокоточными считаются те, что относятся к 3 и 4 поколениям. Врачи отмечают, что лучше всего, если есть выбор, отдавать предпочтение Европейским реагентам, так как их точность достигает 99%. Сроки получения результатов ИФА составляют в среднем от 2 до 10 дней.

Почему ИФА может быть ложной

Важно понимать, что иммуноферментный анализ может давать как ложноположительные, так и ложноотрицательные результаты. Хотя риск подобного развития событий крайне мал.

Ложноотрицательные результаты пациент может получить в том случае, если анализ был сдан слишком рано, и антитела еще не успели образоваться в организме.

Чтобы исключить подобную реакцию, пациентам рекомендуется сдавать анализ несколько раз с различным промежутком времени.

Ложноположительный тест встречается при некоторых заболеваниях. Например, получить положительные результаты могут пациенты с:

  • алкогольным гепатитом;
  • миеломами в большом количестве;
  • некоторыми аутоиммунными болезнями;
  • женщины в период беременности и др.

При подобных заболеваниях кровь человека пополняется антителами. Они могут напоминать по структуре антитела к ВИЧ, что вводит реагенты в замешательство, провоцируя реакцию. Конечно, в последние годы тестовые системы становятся все более и более чувствительными. Однако пока до конца решить проблему ложных результатов не удалось.

Иммуноблоттинг

В современных условиях поставить положительный диагноз ВИЧ, опираясь только на ИФА, нельзя. Необходимо подтверждение полученных результатов, которое выполняется с помощью реакции иммунного блоттинга (иммуноблоттинг, ИБ).

Чтобы выполнить ИБ, в лаборатории должны присутствовать специальные тестовые полоски. На них наносятся вирусные белки. Перед тем, как проводить анализ, кровь пациента, взятую из вены, подготавливают специальным образом.

Полученный биологический материал добавляют в гель, в котором происходит разделение белков по их весу. Затем в полученную массу опускают предварительно заготовленную полосу.

Полоса намокает (происходит блоттинг), на ней выявляются полосы, если в материале есть белки ВИЧ-инфекции. Если белки отсутствуют, намокание не изменяет внешний вид полосы.

Существует несколько трактовок иммуноблоттинга. Однако по какому бы способу конкретная больница или лаборатория не выполняла расшифровку, вероятность правильности постановки диагноза составляет 99,9%.

Может ли иммуноблоттинг давать неверные результаты, часто интересуются пациенты? Да, это возможно, например, если пациент болен туберкулезом, находится в состоянии беременности, страдает от онкологии.

Врачам, назначающим иммуноблоттинг, рекомендуется учитывать ассоциированные состояния, которые могут дать ложноположительные результаты.

ПЦР в помощь

ПЦР – еще один метод, который может диагностировать вирус иммунодефицита человека в крови и других биологических жидкостях, где его концентрация достаточно высока.

Как отмечают доктора, полимеразная цепная реакция может дать положительный результат уже через 10 дней после того, как произошел первый контакт организма с инфекцией.

Важно понимать, что ПЦР в ряде случаев дает ложноположительные результаты. Объясняется это тем, что метод обладает очень высокой чувствительностью.

В результате нередко он реагирует на похожие антитела, свидетельствующие о совсем других патологических процессах в организме пациента.

Несмотря на высокую чувствительность и невысокую вероятность получения ложных результатов, ПЦР не используется повсеместно. Объясняется это несколькими факторами. Во-первых, для выполнения полимеразной цепной реакции требуется специальное оборудование, цена на которое довольно велика. Во-вторых, персонал, работающий с оборудованием, должен обладать высокой квалификацией, что тоже может вызывать затруднения. Эти особенности в комплексе делают ПЦР дорогим методом диагностики и, как следствие, доступным далеко не всем.

Несмотря на то, что ПЦР не является скрининговым методом, его применяют, например, для проверки новорожденного на заражение вирусом иммунодефицита человека.

Экспресс-системы для диагностики

Врачи и ученые потратили множество усилий на то, чтобы создать экспресс-тесты для оценки зараженности ВИЧ-инфекцией. Как отмечают доктора, при использовании этих систем есть возможность получить результат уже через 15 минут после того, как тест был проведен.

Экспресс-тесты на ВИЧ строятся на принципе иммунохроматографии. В систему обычно входит полоска, пропитанная специальными реагентами.

Задача пациента состоит в том, чтобы нанести на нее кровь, сперму или любую другую биологическую жидкость, в которой могут содержаться антитела к вирусу.

Если они обнаружатся, то на полоске появятся две цветные полосы, одна из которых контрольная, а другая диагностическая. Если не обнаружатся, то выявится только контрольная полоса.

Важно понимать, что экспресс-тесты не дают 100% гарантии того, что человек не заражен или, напротив, заражен ВИЧ-инфекцией. В любом случае результаты, полученные с их помощью, необходимо подтверждать в лаборатории с помощью иммуноблоттинга.

Тест-системы экспресс типа удобны пациентам, которые хотят в домашних условиях успокоить себя. Однако, как отмечают доктора, даже если с их помощью человек получил отрицательный результат, при подозрениях на негативные изменения в организме все же стоит обратиться к врачу.

К какому врачу обратиться при подозрении на заражение

Многие пациенты задаются вопросом о том, к какому врачу им обращаться в том случае, если есть подозрение на заражение ВИЧ-инфекцией. В первую очередь рекомендуется посетить врача венеролога. Именно этот медицинский работник специализируются на заболеваниях, которые способны передаваться от человека к человеку половым путем.

Венеролог сможет провести грамотный осмотр, собрать анамнез и принять решение о том, какие обследования необходимы пациенту для точной постановки диагноза. По своему усмотрению он также может направить пациента в инфекционную больницу. Особенно в том случае, если все же подозревает у него ВИЧ.

Вирус иммунодефицита человека – распространенное заболевание. Столкнуться с ним может любой человек, ведущий активную половую жизнь.

Знание особенностей распространения и диагностики этой болезни в современных реалиях является жизненно-необходимым, если пациент хочет сохранить свое здоровье и долголетие. Только своевременное обращение к доктору позволит взять инфекцию под контроль и защититься от нее!

Задачи лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции и используемые тесты.

Лабораторная диагностика при ВИЧ-инфекции направлена на решение двух основных задач: определить ВИЧ-статус пациента (инфицирован /не инфицирован ВИЧ); следить за течением ВИЧ-инфекции и выбирать тактику ведения ВИЧ-позитивного пациента (путем определения стадии ВИЧ-инфекции и прогноза ее течения, формулировки показаний к назначению медикаментозной профилактики оппортунистических инфекций и АРТ, а также проведения контроля эффективности АРТ).

К тестам для лабораторной диагностики при ВИЧ-инфекции можно отнести:

1) тесты для постановки диагноза ВИЧ-инфекции:

  • скрининговые для определения антител к ВИЧ (антител и антигенов ВИЧ): иммуноферментный анализ (ИФА), быстрые тесты;
  • подтверждающие для определения антител к ВИЧ: иммунный блотинг (ИБ);
  • методы амплификации нуклеиновых кислот ВИЧ: качественная ПЦР (ДНК-ПЦР) в культуре лимфоцитов крови;

2) тесты для слежения за течением ВИЧ-инфекции:

  • методы амплификации нуклеиновых кислот ВИЧ: количественная ПЦР (РНК-ПЦР, вирусная нагрузка) в плазме;
  • определение иммунного статуса: CD4 лимфоциты в плазме;

3) тесты для определения лекарственной резистентности.

Постановка диагноза ВИЧ-инфекции.

Постановка диагноза ВИЧ-инфекции. Рутинно диагноз ВИЧ-инфекции устанавливают при серологическом обследовании, тестирование включает получение положительных результатов двух тестов ИФА и одного подтверждающего теста ИБ.

Диагностический алгоритм обследования на ВИЧ-инфекцию

Для тестирования детей, рожденных ВИЧ-позитивными матерями, а также при обследовании медработников, имевших профессиональные контакты с контаминированным ВИЧ материалом, диагностика ВИЧ-инфекции проводится с помощью качественной (ДНК) ПЦР (двукратное определение).

При тестировании донорской крови повысить выявление ВИЧ в период «серологического окна» можно применяя ИФА тест-системы 4 поколения (определяющие как антитела, так и антиген ВИЧ) или качественную (ДНК) ПЦР.

Быстрые тесты позволяют предварительно заподозрить диагноз ВИЧ инфекции и применяются в первую очередь в экстренных ситуациях (обследование беременных, поступивших рожать с неизвестным ВИЧ-статусом, и обследование биоматериала при профессиональных контактах).

1. Серологические методы обнаружения антител (АТ) к ВИЧ — стандарт при диагностике ВИЧ-инфекции (тест-системы ИФА на основе синтетических пептидов — обладают практически 100% чувствительностью и специфичностью). ИФА позволяет выявлять АГ ВИЧ, которые могут являться показателями раннего инфицирования или наоборот позднего — продвинутого развития ВИЧ-инфекции (р24 АГ)

2. Подтверждающие тесты — иммуноблотинг (ИБ), непрямая иммунофлюоресценция (НИФ) и радиоиммунопреципитация (РИП).

а) ВОЗ рекомендует считать положительной сыворотку, имеющую в ИБ антитела к двум оболочечным белкам и к одному из внутренних белков ВИЧ. Пациенты, положительные в ИФА, но имеющие неопределенные результаты в ИБ, должны быть обследованы клинически и оценены другими способами, медицинским обследованием, иммунологически и через 3 — 6 месяцев их сыворотку крови необходимо тестировать на антитела к ВИЧ.

б) метод непрямой иммунофлюоресценции (НИФ) — применяют в качестве подтверждающего теста во многих лабораториях или как скрининговый тест.

в) радиоиммунопреципитация — высоко чувствительный и специфичный метод, основанный на использовании меченых радиоактивными изотопами аминокислот. Метод высоко чувствительный для обнаружения антител к поверхностным белкам и поэтому высокоспецифичен, поскольку эти компоненты вируса присутствуют практически у всех ВИЧ-инфицированных после сероконверсии.

3. Молекулярно-биологические методы: метод молекулярной гибридизации нуклеиновых кислот, ПЦР

ПЦР используют:

1) как альтернативный и дополнительный подтверждающий метод детекции наличия вируса в организме по отношению к серологическим методам лабораторной диагностики;

2) как первый метод специфического анализа при диагностике раннего ВИЧ-инфицирования, когда еще отсутствуют специфические противовирусные антитела;

3) для диагностики ВИЧ-инфицированности новорожденных от ВИЧ-инфицированных матерей;

4) для определения вирусной нагрузки и назначения специфической антиретровирусной терапии и контроля за её проведением;

5) как уточняющий метод при неясных серологических результатах и при несовпадении серологических и культуральных анализов;

6) при исследовании сексуальных партнеров ВИЧ-инфицированных лиц;

7) как метод дифференциальной диагностики ВИЧ-1 и ВИЧ-2;

4. Вирусологический метод.

Лечение ВИЧ-инфекции:

1. Принципы антиретровирусной терапии: лечение должно начинаться до развития существенного иммунодефицита; начальная терапия должна включать комбинации не менее, чем из трех препаратов; модификация терапии должна заключаться в замене или подключении не менее двух новых препаратов; крайне важно измерять уровень СД4+ клеток и вирусную нагрузку; снижение вирусной нагрузки до уровня, лежащего ниже предела определения чувствительных методик, отражает оптимальный эффект лечения.

2. Выделяют три группы современных антиретровирусных препаратов:

б) ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы (ННИОТ):делавердин( рескриптор); невирапин(вирамун); ифавиренц.

3. Монотерапия любым препаратом не может обеспечить достаточно выраженного и длительного подавления репликации ВИЧ. Более того, при монотерапии повышен риск появления резистентных штаммов и развития перекрестной устойчивости к препаратам той же группы. Единственным исключением является использование зидовудина в качестве монотерапии для снижения риска перинатальной передачи ВИЧ.

4. Наиболее важным критерием эффективности терапии является динамика вирусной нагрузки, которую следует определять: без лечения — каждые 6-12 мес, на фоне лечения — каждые 3-6 мес, а также через 4-8 недель после начала противовирусной терапии.

Помимо антиретровирусной терапии необходима терапия присоединившихся вторично заболеваний.

34.3 СПИД (клинические варианты, оппортунистические заболевания).

Опортунистические заболевания — тяжелые, прогрессирующие болезни, которые развиваются на фоне нарастающей иммуносупрессии и не встречаются у человека с нормально функционирующей иммунной системой (СПИД-индикаторные заболевания).

а) первая группа — это заболевания, которые присущи только тяжелому иммунодефициту (уровень СД4+ < 200 кл/мкл) и поэтому определяют клинический диагноз: 1. Кандидоз пищевода, трахеи, бронхов. 2. Внелегочный криптококкоз. 3. Криптоспоридиоз с диареей более 1 месяца. 4. Цитомегаловирусная инфекция с поражением различных органов, помимо печени, селезенки или лимфоузлов. 5. Инфекции, обусловленные вирусом простого герпеса, проявляющиеся язвами на коже и слизистых оболочках. 6. Саркома Капоши у лиц, моложе 60 лет. 7. Первичная лимфома мозга у лиц, моложе 60 лет. 8. Лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная гиперплазия у детей в возрасте до 12 лет. 9. Диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями с внелегочной локализацией. 10. Пневмоцистная пневмония. 11. Прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия. 12. Токсоплазмоз с поражением головного мозга, легких, глаз у больного старше 1 месяца.

б) вторая группа — заболевания, которые могут развиться как на фоне тяжелого иммунодефицита, так и в ряде случаев без него: 1. Бактериальные инфекции, сочетанные или рецидивирующие у детей до 13 лет (более двух случаев за 2 года наблюдения): септицемия, пневмония, менингит, поражения костей или суставов, абсцессы, обусловленные гемофильной палочкой, стрептококками. 2. Кокцидиомикоз диссеминированный (внелегочная локализация). 3. ВИЧ-энцефалопатия 4. Гистоплазмоз, диссеминированный с внелегочной локализацией. 5. Изоспороз с диареей, персистирующей более 1 месяца. 6. Саркома Капоши у людей любого возраста. 7. В-клеточные лимфомы (за исключением болезни Ходжкина) или лимфомы неизвестного иммунофенотипа. 8. Туберкулез внелегочный. 9. Сальмонеллезная септицемия рецидивирующая. 10. ВИЧ-дистрофия.

Наиболее часто встречаются пневмоцистная пневмония, криптококковый менингоэнцефалит, генерализованная цитомегаловирусная инфекция (энцефалит, ретинит, эзофагит, гепатит, колит), сепсис смешанной этиологии, генерализованная форма саркомы Капоши, туберкулез легких.

Все эти заболевания протекают с поражением одного или нескольких органов и систем: головного мозга, легких, печени, желудочно-кишечного тракта и носят тяжелый прогрессирующий характер. СПИД-индикаторные болезни появляются в различных сочетаниях, и даже адекватная терапия не приносит ожидаемого эффекта.

Клинические варианты СПИД: инфекто-, нейро-, онко-СПИД в зависимости от преобладания различной клиники.

35. Критерии выписки:

Своевременная диагностика ВИЧ-инфекции становится крайне важной мерой, т. к. ранее начало лечения может во многом предопределить дальнейшее развитие заболевания и продлить жизнь больного СПИДом. В последние годы наблюдается весомый прогресс в области выявления этой страшной болезни: на смену старым тест-системам приходят более совершенные, методы обследования становятся более доступными, и их точность значительно повышается.

В данной статье расскажем о современных методах диагностики ВИЧ-инфекции, знать которые полезно для своевременного лечения данной проблемы и поддержания нормального качества жизни заболевшего.

Методики диагностики ВИЧ

В России для диагностики ВИЧ-инфекции проводится стандартная процедура, включающая в себя два уровня:

  • ИФА тест- система (скрининговый анализ);
  • иммунный блоттинг (ИБ).

Также для диагностики могут применяться другие методики:

  • ПЦР;
  • экспресс-тесты.

ИФА тест-системы

На первом этапе диагностики для выявления ВИЧ-инфекции применяется скрининговый тест (ИФА), который основан на созданных в лабораториях белках ВИЧ, улавливающих вырабатывающиеся в организме в ответ на инфицирование специфические антитела. После их взаимодействия с реагентами (ферментами) тест-системы изменяется окраска индикатора. Далее эти изменения цвета обрабатываются на специальной аппаратуре, которая и определяет результат выполненного анализа.

Такие ИФА-тесты способны показывать результат уже через несколько недель после внедрения ВИЧ-инфекции. Этот анализ определяет не наличие вируса, а выявляет выработку антител к нему. Иногда, в организме человека выработка антител к ВИЧ начинается через 2 недели поле заражения, но у большинства людей они вырабатываются на более поздних сроках, спустя 3-6 недель.

Существует четыре поколения ИФА-тестов с различной чувствительностью. В последние годы чаще применяются тест-системы III и IV поколения, которые созданы на основе синтетических пептидов или рекомбинантных белков и обладают большей специфичностью и точностью. Они могут использоваться для диагностики ВИЧ-инфекции, мониторинга распространенности ВИЧ и обеспечения безопасности при проверке донорской крови. Точность ИФА-тест-систем III и IV поколения составляет 93-99% (более чувствительны тесты, которые выпускаются в странах западной Европы – 99%).

Для выполнения ИФА-теста проводится забор 5 мл крови из вены пациента. Между последним приемом пищи и анализом должно пройти не менее 8 часов (как правило, он выполняется утром натощак). Такой тест рекомендуется сдавать не ранее, чем через 3 недели после предполагаемого заражения (например, после незащищенного полового акта с новым половым партнером).

Результаты ИФА-теста получаются через 2-10 дней:

  • отрицательный результат: указывает на отсутствие инфицирования ВИЧ и не требует обращения к специалисту;
  • ложноотрицательный результат: может наблюдаться на ранних сроках инфицирования (до 3 недель), при поздних стадиях СПИДа при выраженном подавлении иммунитета и при неправильно проведенной подготовке крови;
  • ложноположительный результат: может наблюдаться при некоторых заболеваниях и при неправильно проведенной подготовке крови;
  • положительный результат: указывает на заражение ВИЧ инфекцией, требует проведения ИБ и обращения пациента к специалисту в центр СПИДа.

Почему ИФА-тест может давать ложноположительные результаты?

Ложноположительные результаты ИФА-теста на ВИЧ могут наблюдаться при неправильной обработке крови или у больных с такими состояниями и заболеваниями:

  • множественная миелома;
  • алкогольный гепатит;
  • инфекционные заболевания, спровоцированные вирусом Эпштейна-Барр;
  • состояние после диализа;
  • аутоиммунные заболевания;
  • на фоне беременности;
  • состояние после вакцинации.

При вышеописанных причинах в крови могут присутствовать неспецифические перекрестно реагирующие антитела, выработка которых была спровоцирована не ВИЧ-инфекцией.

В последние годы частота ложноположительных результатов существенно снизилась благодаря применению тест-систем III и IV поколения, которые содержат более чувствительные пептидные и рекомбинантные белки (они синтезируются при помощи генной инженерии in vitro). После начала применения таких ИФА-тестов частота ложноположительных результатов значительно снизилась и составляет около 0,02-0,5%.

Выявление ложноположительного результата не означает, что человек инфицирован ВИЧ. В таких случаях ВОЗ рекомендует провести еще один ИФА-тест (обязательно IV поколения).

Кровь пациента отправляется в референс или арбитражную лабораторию с пометкой «повторить» и исследуется на ИФА тест-системе IV поколения. Если результат нового анализа отрицательный, то первый результат признается ошибочным (ложноположительным) и ИБ не проводится. При положительном или сомнительном результате во время второго теста больному обязательно назначается проведение ИБ через 4-6 недель для подтверждения или опровержения ВИЧ-инфицирования.

Иммунный блоттинг

Окончательный диагноз инфицирования ВИЧ может устанавливаться только после получения положительного результата иммунного блоттинга (ИБ). Для его проведения применяется нитроцеллюлозная полоска, на которую нанесены вирусные белки.

Забор крови для ИБ выполняется из вены. Далее она подвергается специальной обработке и содержащиеся в ее сыворотке белки разделяют в специальном геле по их заряду и молекулярной массе (манипуляция проводится на специальной аппаратуре под воздействием электрического поля). На гель из сыворотки крови накладывают нитроцеллюлозную полоску и проводят блоттинг («промакивание») в специальной камере. Полоска обрабатывается и если в используемых материалах есть антитела к ВИЧ, то они связываются с антигенными полосами на ИБ и проявляются в виде линий.

ИБ считается положительным если:

  • по критериям American CDC – на полоске есть две или три линии gp41, p24, gp120/gp160;
  • по критериям American FDA – на полоске есть две линии р24, р31 и линия gр41 или gр120/gр160.

В 99,9% случаев положительный результат ИБ указывает на ВИЧ-инфицирование.

При отсутствии линий – ИБ является отрицательным.

При выявлении линий с gр160, gр120 и gр41- ИБ является сомнительным. Такой результат может выявляться при:

  • начальных стадиях ВИЧ-инфицирования ;
  • туберкулезе;
  • онкологических заболеваниях;
  • беременности;
  • частых трансфузиях крови.

В таких случаях рекомендуется выполнение повторного исследования при помощи набора другой фирмы. Если же после дополнительного ИБ результат остается сомнительным, то необходимо наблюдение в течение полугода (через каждые 3 месяца проводятся ИБ).

Полимеразная цепная реакция

Тест на ПЦР может определять РНК вируса. Его чувствительность достаточно высока и он позволяет выявлять ВИЧ-инфицирование уже через 10 дней после заражения. В некоторых случаях ПЦР может давать ложноположительные результаты, т. к. его высокая чувствительность может реагировать и на антитела к другим инфекциям.

Данная методика диагностики является дорогостоящей, требует специального оборудования и высокой квалификации специалистов. Эти причины не дают возможности проводить ее при массовом тестировании населения.

ПЦР применяется в таких случаях:

  • для выявления ВИЧ у новорожденных, которые родились от ВИЧ-инфицированных матерей;
  • для выявления ВИЧ в «периоде окна» или при сомнительном ИБ;
  • для контроля концентрации ВИЧ в крови;
  • для исследования донорской крови.

Только по тесту ПЦР диагноз ВИЧ не ставится, а проводится в качестве дополнительного метода диагностики для разрешения спорных ситуаций.


Экспресс-методы

Одной из инноваций в диагностике ВИЧ стали экспресс-тесты, результаты которых могут оцениваться уже через 10-15 минут. Наиболее эффективные и точные результаты получаются при помощи иммунохроматографических тестах, основанных на принципе капиллярного потока. Они представляют собой специальные полоски, на которые наносится кровь или другие исследуемые жидкости (слюна, моча). При наличии антител к ВИЧ спустя 10-15 минут на тесте появляются цветная и контрольная полоска – положительный результат. При отрицательном результате – появляется только контрольная полоска.

Как и после тестов ИФА, результаты экспресс-тестов должны подтверждаться анализом ИБ. Только после этого может ставиться диагноз о ВИЧ-инфицировании.

Существуют экспресс-наборы для домашнего тестирования. Тест OraSure Technologies1 (США) одобрен FDA, продается без рецепта и может применяться для выявления ВИЧ. После проведения теста, в случае положительного результата, больному рекомендуется пройти обследование в специализированном центре для подтверждения диагноза.

Остальные тесты для домашнего использования еще не были одобрены FDA и их результат может быть очень сомнительным.

Несмотря на то, что экспресс-тесты по своей точности уступают ИФА-тестам IV поколения, они широко применяются для дополнительного тестирования населения.

Сдать анализы на выявление ВИЧ-инфекции можно в любой поликлинике, ЦРБ или в специализированных СПИД-центрах. На территории России они проводятся абсолютно конфиденциально, или анонимно. Каждый пациент может рассчитывать на получение медицинской или психологической консультации до или после проведения анализа. Платить за тесты на ВИЧ придется только в коммерческих лечебных учреждениях, а в государственных поликлиниках и больницах они выполняются бесплатно.

О том, какими путями можно заразиться ВИЧ-инфекцией и какие мифы существуют о возможностях заразиться, читайте в этой статье.

К какому врачу обратиться

Чтобы обследоваться на ВИЧ-инфекцию, нужно посетить терапевта и взять у него направление на анализ. Кроме того, можно прийти непосредственно в Центр профилактики и борьбы со СПИДом и сдать анализы там анонимно. Направляет на это обследование и врач-инфекционист или венеролог при подозрении на ВИЧ-инфекцию.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *